细胞基因敲除
细胞的基因敲除:利用Cas9/gRNA技术,构建针对需要敲除的基因的gRNA序列,通过电转或者慢病毒介导的方式,使得细胞在特定基因上造成不同剪辑缺失的情况。
细胞基因敲除经药物筛选后,获得单细胞克隆,抽提DNA,PCR产物TA克隆,每个细胞系送3-5个克隆测序分析,提供单拷贝和双拷贝敲除的细胞系至少各2株。适用范围:人或小鼠等细胞系,并且该基因双拷贝敲除后不会导致细胞致死的情况。否则,只能提供单拷贝敲除的细胞系。